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紫外可見分光光度計的原理及常見應(yīng)用

發(fā)表時間:2020-04-14 16:13:38    瀏覽次數(shù):1645

1854年,杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人將朗伯比爾定律應(yīng)用于定量分析化學(xué)領(lǐng)域,并且設(shè)計了第一臺比色計。            1918年,美國國家標(biāo)準(zhǔn)局制成了第一臺紫外可見分光光度計。此后,紫外可見分光光度計經(jīng)不斷改進(jìn),又出現(xiàn)自動記錄、自動打印、數(shù)字顯示、微機(jī)控制等各種類型的儀器,使分光光度法的靈敏度和準(zhǔn)確度也不斷提高,應(yīng)用范圍不斷擴(kuò)大。

        紫外紫外可見分光光度計的工作原理又是什么呢?

基于朗伯-比耳(Lambert-Beer)定律,即物質(zhì)在一定濃度下的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度呈正比。 
通常表述為:當(dāng)一束平行的單色光通過某一均勻的有色溶液時,溶液的吸光度與溶液的濃度和光程的乘積成正比,其數(shù)學(xué)表達(dá)式如下: A=-lg( It/I0 )= - lgT= =εbC式中,A 為吸光度;I0為入射的單色光強(qiáng)度;It為透射的單色光強(qiáng)度;T為物質(zhì)的透射率;ε為摩爾吸光系數(shù)(L·mol-1·cm-1);b為被吸收層厚度(cm),即比色皿的光程;C為物質(zhì)的摩爾濃度(mol·L-1);

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那么紫外可見分光光度計適用于哪些領(lǐng)域呢?

紫外-可見分光光度計廣泛應(yīng)用于制藥、醫(yī)療衛(wèi)生、化工、能源、機(jī)械、冶金、環(huán)保、地質(zhì)、食品、生物、材料、農(nóng)業(yè)、林業(yè)、漁業(yè)等行業(yè),在高等教育、計量科學(xué)和科研院所中的教學(xué)、科研領(lǐng)域,以及生產(chǎn)中的質(zhì)量控制,原材料和產(chǎn)品檢驗等各方面發(fā)揮著重要作用,是理化實驗室常用的分析儀器。

具體應(yīng)用如下:

1)核酸、蛋白濃度測量以及細(xì)菌生長濃度測量。

2)食品、水質(zhì)、合金等樣品中的金屬元素(如鐵、錳、鎘、銅、鋁等)及非金屬元素(如硅、磷/磷酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽、氟化物等)分析。

3)與其他分析儀器聯(lián)用,并進(jìn)行定性分析,如有機(jī)化合物的分析、藥物分析。常見的 分析手段如:與標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照;比較最大吸收波長吸收系數(shù)的一致性。